残留DNA检测方法
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残留DNA检测方法在临床上常用的是荧光染色法。具体操作如下:
1、打开生物安全柜紫外灯照射半小时以上,照射完毕后,关闭紫外灯,打开通风机。
2、生物安全柜亮灯后,取酒精喷壶消毒操作台面以及一次性无菌移液管。将消毒后的灭菌枪头盒、细胞培养板等物品放入生物安全柜内。
3、取出待检样品移入生物安全柜内,使用无菌滴管将上清取出,移入试管内。
4、准备三个汇合度在30-40%的T25瓶Vero细胞,把培养上清、无抗生素培养基、支原体阳性细胞分别加入到瓶内。
5、将三个瓶子用酒精消毒后置于培养箱内,培养3-5天。将培养的Vero细胞分别接种在培养板内,再将适量培养液分别加入培养板内,盖上盖子摇晃混合,使细胞分散均匀。
6、将培养板放入培养箱内,培养3-5天。取出培养基,用真空泵将培养基全部吸干净,然后往培养板内均匀加入无菌PBS溶液,摇晃漂洗后再吸走,重复三次。
7、最后加入新鲜的5ml固定液,放置15分钟后吸走,等待自然晾干。
8、接着往孔中加入染液,避光染色半小时后吸走染液。往培养板中加入纯水,摇晃清洗后吸走,重复三次后等自然晾干。
9、把自然晾干的培养板放置显微镜下,打开荧光激发电源开关,运行荧光成像软件,观察培养板。
若需进行该操作,建议前往正规医院,在专业医生的指导下进行操作,保证检查结果的准确性。
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