殘留DNA檢測方法
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殘留DNA檢測方法在臨牀上常用的是熒光染色法。具體操作如下:
1、打開生物安全櫃紫外燈照射半小時以上,照射完畢後,關閉紫外燈,打開通風機。
2、生物安全櫃亮燈後,取酒精噴壺消毒操作檯面以及一次性無菌移液管。將消毒後的滅菌槍頭盒、細胞培養板等物品放入生物安全櫃內。
3、取出待檢樣品移入生物安全櫃內,使用無菌滴管將上清取出,移入試管內。
4、準備三個匯合度在30-40%的T25瓶Vero細胞,把培養上清、無抗生素培養基、支原體陽性細胞分別加入到瓶內。
5、將三個瓶子用酒精消毒後置於培養箱內,培養3-5天。將培養的Vero細胞分別接種在培養板內,再將適量培養液分別加入培養板內,蓋上蓋子搖晃混合,使細胞分散均勻。
6、將培養板放入培養箱內,培養3-5天。取出培養基,用真空泵將培養基全部吸乾淨,然後往培養板內均勻加入無菌PBS溶液,搖晃漂洗後再吸走,重複三次。
7、最後加入新鮮的5ml固定液,放置15分鐘後吸走,等待自然晾乾。
8、接着往孔中加入染液,避光染色半小時後吸走染液。往培養板中加入純水,搖晃清洗後吸走,重複三次後等自然晾乾。
9、把自然晾乾的培養板放置顯微鏡下,打開熒光激發電源開關,運行熒光成像軟件,觀察培養板。
若需進行該操作,建議前往正規醫院,在專業醫生的指導下進行操作,保證檢查結果的準確性。
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